Н. Федяшина - 250 показателей здоровья
Для измерения pH используются лакмусовая бумага и другие индикаторы широкого диапазона, индикатор бромтимоловый синий, узкодиапазонные pH-индикаторные бумаги, или метод ионометрии.
Определение pH индикаторами (жидкие индикаторы или индикаторная бумага) . При помощи индикаторной бумаги исследование производят следующим образом. При светлой моче бумагу погружают в нее на 2–3 с, а при мутной или сильно окрашенной моче 1–2 капли помещают на индикаторную бумагу, и ее цвет с обратной стороны сравнивают со стандартной цветовой шкалой. Точность определения этим методом – 0,2–0,5 pH единиц.
Удельный вес мочи
Удельный вес измеряют пикнометром, ареометром-урометром, весами Мора – Вестфаля.
Исследование удельного веса урометром . В мочу, доведенную предварительно до комнатной температуры (20–25 °C) и налитую в цилиндрический сосуд (образовавшуюся пену следует удалять фильтровальной бумагой), погружают урометр. Удельный вес отсчитывают по шкале урометра, причем отмечается деление, соответствующее уровню нижнего мениска жидкости. Обычно урометры снабжены шкалой с делениями от 1000 до 1040. Во время отсчитывания ареометр не должен соприкасаться со стенками и дном цилиндрического сосуда. В случае, если температура измеряемой мочи отличается от температуры, на которую рассчитаны показания урометра (обычно 15 °C – это обозначено на каждом урометре), то приходится вносить поправки, причем на каждые 3 °C повышения или понижения по сравнению с температурой калибрации добавляют или соответственно вычитают 0,001 величины установленного удельного веса. Нулевой пункт урометра проверяется периодически дистиллированной водой. При протеинурии или глюкозурии удельный вес увеличивается в зависимости от количества выделенных веществ (белка или сахара). Для практического клинического применения определяют удельный вес цельной мочи и количество белка, а затем рассчитывают теоретический удельный вес «безбелковой мочи». Более точные результаты получаются при применении пикнометра, однако этот метод, будучи много сложнее, реже применяется в практике. Необходимо помнить, что повышение температуры мочи на каждые 3 °C снижает удельный вес на 0,001, а присутствие белка до 4 г/л повышает на 0,001. Но при значительном содержании белка рекомендуется в величину удельного веса вносить следующие поправки: при наличии белка 4–7 г/л вычитать 0,001, при белке 8—11 г/л – 0,002, 12–15 г/л – 0,003, 16–20 г/л – 0,004 и свыше 20 г/л – 0,005. Удельный вес утренней мочи, превышающий 1,018, свидетельствует о сохраненной концентрационной способности почек.
При выделении с мочой контрастных веществ при рентгенологическом исследовании удельный вес может достигнуть 1040–1060.
На основании удельного веса можно вычислить приблизительное количество растворенных в моче плотных веществ. Путем умножения двух последних цифр величины удельного веса суточного количества мочи на 2,6 (коэффициент Haser) получается приблизительное количество растворенных субстанций (выраженное в граммах) в 1000·мл мочи.
Определение белка
Существуют качественные и количественные методы определения протеина в моче.
Качественные методы: проба с сульфосалициловой кислотой; нагревание мочи в уксуснокислой среде; обнаружение белка с помощью индикаторной бумаги и др.
Количественные методы: унифицированный метод Брандберга – Робертса – Стольникова; проба с сульфосалициловой кислотой; биуретовый метод и др.
Качественные пробы определения белков в моче основаны на принципе денатурации и преципитации (осаждения) белков посредством прибавления реактива. Результаты качественных проб отмечают следующим образом: (-), опалесценция (+), (++), (+++).
Проба с сульфосалициловой кислотой . Проба с сульфосалициловой кислотой весьма чувствительна. Она дает положительную реакцию при содержании в моче 0,015 % белка. Одновременно с протеинами при этой пробе осаждаются также и пептоны (продукты распада белков под воздействием ферментов желудочного сока при пищеварении), которые, однако, при нагревании снова переходят в раствор. Положительный результат пробы можно получить при высокой концентрации мочевой кислоты, а также и при употреблении сульфанилурейных препаратов.
Унифицированный метод Брандберга – Робертса – Стольникова . Метод основан на кольцевой пробе Геллера, которая заключается в том, что при добавлении к моче азотной кислоты при наличии белка на границе сред происходит его свертывание с появлением белого кольца.
Биуретовый метод . Учитывается, что структурные связи белка образуют в щелочной среде с солями меди соединение фиолетового цвета.
Определение уропротеинов Бенса – Джонса (Bence – Jones) . Этот белок представляет собой белковое тело группы глобулинов с молекулярным весом 35 000—44 000. Белок Бенса – Джонса – иммуноглобулин, продуцируемый клетками миеломы. В настоящее время определяется иммунологическими методами. Белка Бенса – Джонса не может быть при отрицательной реакции с сульфосалициловой кислотой и при отрицательной пробе Геллера. Пробирку с несколькими миллилитрами мочи помещают в водяную баню, снабженную термометром. Воду нагревают постепенно. Реакция считается положительной, если при температуре около 40 °C появляется мутный осадок, который исчезает при нагревании выше 60 °C. Более четкий результат можно получить, если перед нагреванием мочу подкислить уксусной кислотой и прибавить несколько капель 1 %-ного раствора хлорида кальция (CaCl2).
Обнаружение в моче белка Бенса – Джонса на основе реакции термопреципитации с помощью 2М ацетатного буфера pH 4,9 . Если концентрация белка менее 3 г/л, то проба может быть отрицательной. Это встречается нечасто, так как концентрация белка Бенса – Джонса в моче обычно значительна.
Определение глюкозы мочи
В норме за сутки здоровый человек через мочевыделительную систему теряет менее 2,78 ммоль глюкозы.
Качественные методы: с помощью индикаторных полосок; проба Фелинга; проба Бенедикта и др.
Унифицированный метод определения глюкозы с помощью индикаторных полосок . Метод основан на окислении глюкозы при помощи фермента глюкозооксидазы. В процессе окисления образуется перекись водорода (Н2О2) и разлагается пероксидазой, а затем дает реакцию с красителем. Изменение окраски красителя говорит о присутствии глюкозы в исследуемой моче. Пропитанную смесью красителя и ферментов реактивную бумагу применяют для определения наличия глюкозы в моче в виде полосок.
Количественные методы: глюкозооксидантный метод; ортотолуидиновый метод; унифицированный поляриметрический.
Унифицированный поляриметрический метод определения содержания глюкозы
Метод основан на свойстве раствора D-глюкозы поворачивать плоскость поляризованного света вправо. Чем больше угол вращения плоскости, тем больше концентрация глюкозы в растворе.
Определение кетоновых тел
К кетоновым телам относятся ацетон, ацетоуксусная и 3-оксимасляная кислоты.
В норме выделяется 20–50 мг кетоновых тел в течение суток.
Для определения кетоновых тел применяют:
1) унифицированную пробу Ланге;
2) модифицированную пробу Ротеры;
3) готовые наборы для экспресс-анализа ацетона в моче.
Определение желчных пигментов
Моча здоровых людей содержит минимальные количества желчных пигментов, которые не обнаруживаются качественными пробами.
Билирубинурия встречается в основном при поражении структуры печени (паренхиматозные желтухи) и при механических затруднениях оттока желчи (механические желтухи). При гемолитической желтухе билирубин в моче отсутствует, что имеет диагностическое значение.
Унифицированная проба Розина
В пробирку вносят 5 мл мочи и аккуратно по стенкам наслаивают 1 %-ный спиртовой раствор йода. При наличии билирубина появляется зеленое кольцо на границе между средами.
Проба Готфрида
Принцип пробы Готфрида взят за основу в экспресс-тестах, производимых рядом зарубежных фирм.
Определение уробилиноидов
Уробилиноиды являются производными билирубина. Уробилиноиды образуются из желчного билирубина под действием клеток слизистой оболочки кишечника и ферментов бактерий. В норме в моче содержится незначительное количество уробилиногена, который при длительном стоянии мочи окисляется в уробилин. Причиной уробилинурии может быть снижение детоксикационной функции печени, которая теряет способность разрушать мезобилиноген, поступающий из кишечника. При паренхиматозной желтухе это является причиной уробилинурии.
Повышенное образование в кишечнике стеркобилиногена встречается при гемолизе эритроцитов.
