Сергей Бабичев - Медицинская микробиология, иммунология и вирусология
Лабораторная диагностика. Материалом для исследования служат отделяемое язв, гной, мокрота, ликвор, кровь, костный мозг, моча. Препараты окрашивают по Граму, Цилю – Нильсену, Романовскому – Гимзе. Внутри цитоплазмы клеток или внеклеточно видны мелкие круглые почкующиеся дрожжеподобные клетки, окруженные светлым ореолом. Микологическое исследование имеет значительное преимущество перед микроскопическим: выделение культуры гриба свидетельствует о заболевании гистоплазмозом, так как носительство гриба у здоровых не обнаружено. Лучше делать посевы на среды с антибиотиками. Материал можно также вводить внутрибрюшинно белым мышам, которых через 4 нед. забивают и из печени и селезенки выделяют чистую культуру. Вспомогательное значение имеют аллергический метод (кожная проба с гистоплазмином) и серологические реакции (РСК, агглютинации, преципитации). Возрастание титра антител, выявляемых в РСК, свидетельствует о генерализации процесса.
Специфическая профилактика и лечение. Имеются сообщения о положительном эффекте использования живых клеток дрожжевой фазы для иммунизации. Иммунизация подавляет развитие гриба в организме, снижает количество тканевых форм, но не освобождает полностью от возбудителя. Для лечения используют флюкостат, нистатин, леворин, сульфамиды, а также низорал, амфотерицин B.
Споротрихоз (болезнь Шенка)
Встречается почти во всех странах мира, чаще во Франции и США. Возбудитель – Sporotrichum schencki – гриб, обладающий диморфизмом, относится к нитчатым грибам, гифомицетам. Описаны его совершенные формы, названные Seratocystis ctenoceus. Тканевые формы нечасто обнаруживаются в срезах тканей и в патологическом материале, имеют вид мелких грамположительных почкующихся клеток округлой или сигарообразной формы («челночки») размерами 2 – 5 мкм, покрытых небольшим слоем слизи. Они обычно находятся внутри макрофагов. Иногда встречаются дрожжеподобные почкующиеся клетки диаметром 2 – 8 мкм и так называемые «астроидные» тела – грибковые клетки, окруженные эозинофильными комплексами антиген + антитело.
В культурах споротрихум встречается в мицелиальной и дрожжевой формах. Дрожжевые формы развиваются при температуре 37 °C на богатых белками и витаминами средах в виде овальных и удлиненных клеток размером 1 – 2 × 4 – 8 мкм;
встречаются круглые клетки, почкующиеся, иногда связанные друг с другом длинной клеткой. Колонии их мягкие, гладкие, желтоватого цвета, появляются на 4 – 6-й день. Позднее колонии увеличиваются в размерах, становятся сероватыми, складчатыми или церебриформными, медленно растут и редко сливаются.
Колонии мицелиальной формы на разных средах различные: некоторые растут ровным газоном, у других выражена бугристость в центре. Встречаются складчатые, крупнобугристые или многопетлистые, возвышающиеся колонии светло-желтого или шоколадного, почти черного цвета. Пигмент водонерастворимый. На жидких средах гриб растет войлокообразным комочком на дне и в виде складчатой серобелой пленки на поверхности. Мицелий ветвистый, септированный, диаметром
1,0 – 2,5 мкм, длиной от 10 до 30 мкм и больше. Конидии гриба овальные, круглые, грушевидные или цилиндрические, некоторые с заостренными концами, длиной от 2 – 4 до 6 – 8 мкм, шириной 1,5 – 3,0 мкм; располагаются обычно попарно одна против другой по бокам мицелия или группами по 5 – 10 спор на конце, иногда в виде розетки. В мицелиальных культурах встречаются так называемые коремии, представляющие собой тесно прилегающие, нередко анастомозирующие нити с микроконидиями на воздушных концах. Нити иногда искривленные, заканчиваются тонкими усиками и завитками. В зрелых формах и старых культурах можно видеть хламидоспоры, обычно интеркаларные, реже терминальные.
Факторами, способствующими распространению гриба и развитию инфекции, являются тепло и влажность, поэтому споротрихоз регистрируется преимущественно в странах с тропическим и субтропическим климатом, а в зоне умеренного климата – в теплое время года. У человека отмечается носительство гриба после перенесенного заболевания. Источником инфекции являются почва, некоторые растения, так как споротрихум живет в природе как сапрофит или вегетирует на растениях.
Патогенез и клиника. Грибы проникают в кожу конечностей при травме (в 80 % случаев) или через слизистые оболочки, дыхательные пути, желудочно-кишечный тракт. Обычно инфекция развивается на фоне ослабленной резистентности (туберкулез, алкоголизм, нарушения обмена веществ). В месте повреждения развивается поражение в виде пустулы, абсцесса или язвы, лимфатические сосуды утолщаются и уплотняются. Вдоль лимфатических сосудов, отходящих от первичного очага, образуются множественные подкожные узлы и абсцессы. Обычно системное заболевание при таких поражениях не развивается, однако иногда может происходить диссеминация возбудителя, и поражаются внутренние органы и кости. В очагах поражения обнаруживаются хроническая воспалительная реакция и гранулемы с некротическими изменениями и «астероидными» телами.
Лабораторная диагностика. При микроскопии исследуют гной или биоптаты для обнаружения характерных клеток возбудителя, но эти находки непостоянны. Хорошие результаты обычно дает посев для выделения чистой культуры возбудителя;
посев делают на богатые среды и на среду Сабуро и инкубируют при 37 °C и комнатной температуре в течение 20 – 25 дней, затем грибы микроскопируют для обнаружения дрожжевой и мицелиальной форм. Для выделения культуры гриба используют также внутрибрюшинное, подкожное или интратестикулярное заражение животных (мыши, крысы, хомячки, морские свинки). Из серологических методов используют реакции агглютинации, РСК, преципитации, латекс-агглютинации; антитела обычно обнаруживаются в высоких титрах.
Специфическая профилактика не разработана. При лечении хороший эффект дает использование препаратов йода (йодид калия) и амфотерицина В.
Хромомикоз
Заболевание встречается повсеместно в виде спорадических случаев, преимущественно в тропической и субтропической зонах (Куба, Бразилия, Гвинея). Хромомикоз вызывается несколькими видами «черных плесеней», чаще всего Phialophоra verrucosa, Fonsecaea pedrosoi, F. dermatitidis, Cladosporium carrionii. Это диморфные грибы, относящиеся к дейтеромицетам.
В патологическом материале возбудитель чаще всего представлен темно-коричневыми округлыми клетками диаметром 5 – 15 мкм, иногда многоугольными или неправильной формы, расположенными среди эритроцитов и лейкоцитов. Клетки имеют толстую двухконтурную оболочку и разделены поперечной или продольной перегородкой. Располагаются отдельно или небольшими группами. Часто между такими клетками, эритроцитами и лейкоцитами обнаруживаются нити мицелия. Вокруг крупных клеток гриба иногда обнаруживаются зерна, сходные с актиномикотическими. При окраске по Граму гриб выявляется плохо, по Романовскому – Гимзе стенки клеток гриба окрашиваются в зеленоватый цвет, а по Цилю – Нильсену – в темно-красный.
Гриб хорошо растет как при комнатной температуре, так и при 26 – 28 °C; на 3 – 5-й день колонии имеют вид темно-серых пушистых точек. К 10 – 17-му дню колония становится зрелой: она округлая, конусовидная, ворсистая или пушистая, имеет зеленовато-сероватый цвет. Отдельные колонии могут сливаться в сплошную массу, окруженную мелкими пушистыми разбросанными колониями темного цвета. На жидких средах растут на дне округлыми комочками черноватого цвета.
Культура представлена мицелием, от которого отходят вторичные ответвления. Мицелий редко септированный и может быть двух типов: вегетативный и конидиеносцы. Конидиеносцы более септированы, на их несколько расширенных концах располагаются конидии. Встречаются кистеподобные скопления спор, а также одиночно или группами расположенные желтовато-буроватые хламидоспоры диаметром 10 – 12 мкм, с толстыми темными стенками. Различают следующие типы споруляции этих грибов: hormodendrum, acrotheca, phialophora.
Тип hormodendrum характеризуется концевыми конидиофорами с усеченными мелкими выпуклостями, к которым прикрепляются споры оливкового цвета, яйцевидные, одно– или двухклеточные, размерами 1,5 – 3,0 × 3,0 – 5,0 мкм, расположены цепочками. Тип acrotheca представлен концевыми или боковыми конидиофорами, напоминающими по форме дубинку и образующими латеральные конидии диаметром 2 – 3 мкм. Тип phialophora характеризуется овальными или удлиненными конидиями, расположенными на бутылкообразных конидиофорах.
Возбудители хромомикоза могут расти без добавления углеводов и азотистых веществ на увлажненном гнилом дереве, соломе, различных злаках, гнилых листьях, бумаге, в почве. Хромомикоз – неконтагиозное заболевание, больной не заразен для окружающих.
